一、基础信息

  • 中文全称:N 端生物素修饰犬胃动素
  • 英文名称:Biotinyl-Motilin (canine)
  • 三字母序列:Biotin-Phe-Val-Pro-Ile-Phe-Thr-His-Ser-Glu-Leu-Gln-Lys-Ile-Arg-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly-Gln
  • 单字母序列Bio-FVPIFTHSELQKIREKERNKGQ
  • 氨基酸总数:22 aa
  • 分子式:C120H194N36O34
  • 分子量:2685.09
  • 修饰说明
  1. N 端修饰:Biotin(简写 Bio,生物素酰基);
  2. 线性直链多肽,C 端游离羧基,无酰胺、环化、二硫键、焦谷氨酸、乙酰修饰;
  3. 无侧链定点修饰。
  • 结构式

二、理化性质

1.紫外定量:仅含 Phe,280 nm 弱紫外吸收;也可采用 BCA / 氨基酸水解定量。

2.稳定性要点

  • 不含 Met、Cys,无氧化降解风险;仅 Phe 为弱光敏残基,常规避光即可;
  • 含 Pro 形成局部刚性转角;仅 N 端生物素封闭氨基端,C 端游离易被羧肽酶、内肽酶水解,工作液现配现用。

3.酸碱特性
酸性残基:Glu;碱性残基:Lys、Arg、His;整体偏弱酸性;适配 pH 6.0–7.4 PBS、犬小肠上皮细胞培养液、犬血浆缓冲体系。

4.溶解性
Ser、Asn、Gln 亲水残基搭配大量带电氨基酸,水溶性优良,中性缓冲液常温完全溶解。

5.空间构象
N 端 Pro 形成弯折,整体柔性肽;完整序列为犬胃动素受体识别必需区域;N 端生物素不干扰配体 - 受体结合。

三、来源背景

犬小肠 M 细胞分泌的内源胃动素,序列与人、猪存在显著物种差异;N 端偶联生物素作为犬专属亲和探针,用于犬胃肠动力、受体互作相关体外实验。

四、生物学功能

  1. 特异性激活犬胃动素受体 MTLR,诱导消化间期肠道移行性复合运动、促进胃排空;
  2. 调控胆囊收缩、基础胰腺分泌;
  3. 调节小肠内分泌细胞激素释放;
  4. 生物素标签可结合链霉亲和素,Pull-down 富集犬源胃动素受体及互作蛋白,用于结合竞争、荧光示踪实验。

五、科研应用

  1. 犬小肠原代细胞 Pull-down,捕获犬 MTLR 受体及结合蛋白;
  2. 犬胃动素受体激动剂 / 拮抗剂体外筛选、竞争性结合实验;
  3. 犬消化不良、胃肠动力障碍体外细胞模型;
  4. 人 / 猪 / 犬胃动素序列、受体亲和力物种对比研究;
  5. 犬胃肠道激素分泌调控机制、受体组织分布示踪。

六、溶解与储存规范

  1. 溶解:pH7.2 无菌 PBS 常温避光配制,无需冰浴防氧化;
  2. 冻干粉:短期 - 20 ℃密封避光;长期分装 - 80 ℃避光储存;
  3. 工作液:单次分装避免反复冻融;2–8 ℃避光可稳定存放 7–10 天。

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