Biotinyl-Neuromedin B (porcine);Bio-GNLWATGHFM-NH₂
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一、基础信息
- 中文名称:N 端生物素修饰猪神经介素 B
- 英文全称:Biotinyl-Neuromedin B (porcine)
- 三字母序列:Biotin-Gly-Asn-Leu-Trp-Ala-Thr-Gly-His-Phe-Met-NH₂
- 单字母序列:Bio-GNLWATGHFM-NH₂
- 氨基酸数量:10 aa
- 分子式:C52H73N15O12S
- 分子量:1132.31
- 结构修饰说明:
- N 端共价修饰生物素(Biotin / Bio);
- C 端酰胺化 -NH₂,封闭羧基末端;
- 无二硫键、环化、焦谷氨酸、乙酰修饰,侧链无额外标记。
- 结构式:
二、理化性质
1.紫外定量:含 Trp、Phe、Met,280 nm 紫外吸收强,可直接紫外分光光度法定量。
2.稳定性要点
- 含 Met,极易氧化失活;溶解、分装全程冰浴,减少空气暴露,长期冻干粉充氮气隔氧保存;
- Trp、Phe 均为光敏残基,配制、储存全程避光;
- 无 Pro,肽链柔性高;两端 Bio 与酰胺双重封闭,抵抗氨基肽酶 / 羧肽酶,水溶液易被内肽酶剪切,工作液现配现用。
3.酸碱特性
仅 His 为弱碱性残基,无酸性氨基酸,整体近中性;适配 pH 6.0–7.6 PBS、猪胃肠 / 胰腺细胞培养液、血浆缓冲体系。
4.溶解性
Gly、Asn、Thr 亲水骨架,水溶性优良,中性缓冲液常温完全溶解。
5.空间构象
柔性短肽,C 端序列为 BB1 受体偏好结合核心;N 端生物素远离受体结合口袋,不影响与蛙皮素家族受体结合亲和力。
三、来源背景
神经介素 B(Neuromedin B)属于蛙皮素家族内源肽,猪源成熟 10 肽,优先激活 BB1 受体;N 端偶联生物素制成亲和探针,用于猪源细胞 BB 受体分型、互作蛋白捕获实验。
四、生物学功能
- 选择性高亲和力激动 BB1 受体,弱激活 BB2;刺激胃酸分泌、胰腺外分泌;
- 促进胃肠平滑肌收缩,调节摄食、中枢体温与应激信号;
- 诱导肿瘤细胞钙内流、增殖迁移;
- 生物素标签可结合链霉亲和素树脂,Pull-down 富集 BB1 受体及其相互作用蛋白。
五、科研应用
- Pull-down 实验特异性富集 BB1 受体,区分 BB1/BB2 受体分布;
- BB 受体亚型选择性激动剂、拮抗剂体外筛选;
- 胰腺腺泡、胃肠道内分泌细胞体外功能模型;
- Neuromedin B / Neuromedin C / Bombesin 构效对比研究。
六、溶解与储存规范
- 溶解:pH7.2 无菌 PBS 冰浴避光配制,缩短敞口时间减少 Met 氧化;
- 冻干粉:短期 - 20 ℃避光密封;长期分装充氮气隔氧,-80 ℃避光储存;
- 工作液:单次分装避免反复冻融;2~8 ℃避光存放不超过 3 天。
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