Biotinyl-Neurokinin A ;Bio-HKTDSFVGLM-NH₂
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一、基础信息
- 中文名称:N 端生物素修饰神经激肽 A
- 英文全称:Biotinyl-Neurokinin A
- 三字母序列:Biotin-His-Lys-Thr-Asp-Ser-Phe-Val-Gly-Leu-Met-NH₂
- 单字母序列:Bio-HKTDSFVGLM-NH₂
- 氨基酸总数:10 aa
- 分子式:C50H80N14O14S
- 分子量:1133.33
- 结构修饰说明:
- N 端修饰:Biotin(简写 Bio,生物素酰基);
- C 端酰胺化 -NH₂,封闭羧基末端;
- 无环化、二硫键、焦谷氨酸、乙酰、侧链定点修饰。
- 结构式:
二、理化性质
1.紫外定量:含 Phe、Met,280 nm 具备紫外吸收,可直接紫外分光光度法测定多肽浓度。
2.稳定性要点
- 含 Met,极易氧化失活;配液、分装全程冰浴,减少空气接触;长期冻干粉建议充氮气隔氧保存;
- Phe 为光敏残基,配制、储存全程避光;
- 无 Pro,肽链柔性高;N 端生物素、C 端酰胺两端封闭,抵御氨基肽酶与羧肽酶,但水溶液易被内肽酶降解,工作液建议现配现用。
3.酸碱特性
酸性残基:Asp;碱性残基:His、Lys;整体偏弱碱性;适配 pH 6.0–7.6 PBS、神经元、气道平滑肌细胞培养液、血浆缓冲液。
4.溶解性
Thr、Ser 亲水残基搭配带电酸碱氨基酸,水溶性良好,中性缓冲液常温可完全溶解。
5.空间构象
柔性短肽,C 端 FVGLM-NH₂为 NK2 受体核心识别结构域;N 端生物素远离受体结合口袋,不影响多肽与速激肽受体结合亲和力。
三、来源背景
神经激肽 A(Neurokinin A,NKA)属于速激肽家族内源肽,由前速激肽 A 剪切生成;N 端偶联生物素作为亲和探针,用于 NK 受体互作、竞争性结合、Pull-down 实验。
四、生物学功能
- 优先高亲和力激动 NK2 受体,弱结合 NK1、NK3;
- 外周强效收缩气道、肠道、泌尿平滑肌,介导气道痉挛、内脏痛;
- 诱导血管扩张、血浆渗出、炎症因子释放,参与神经源性炎症;
- 中枢调控疼痛传导、应激、下丘脑内分泌;
- 生物素标签可特异性结合链霉亲和素,捕获细胞膜 NK 受体及其相互作用蛋白。
五、科研应用
- Pull-down 亲和富集 NK2 受体及下游结合蛋白;
- NK 受体亚型选择性激动剂 / 拮抗剂体外筛选、竞争性结合实验;
- 气道平滑肌、肠平滑肌收缩体外功能模型;
- 神经痛、哮喘、肠道炎症相关机制研究;
- P 物质、NKA、NPK 速激肽家族构效对比实验。
六、溶解与储存规范
- 溶解:pH7.2 无菌 PBS 冰浴避光配制,缩短敞口时间降低 Met 氧化;
- 冻干粉:短期 - 20 ℃避光密封;长期分装充氮气隔氧,-80 ℃避光储存;
- 工作液:单次分装避免反复冻融;2~8 ℃避光存放不超过 3 天。
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