一、基础信息

  • 中文全称:N 端生物素修饰猪成熟 26 肽脑钠肽 BNP-26
  • 英文全称:Biotinyl-Brain Natriuretic Peptide-26 (porcine)
  • 三字母序列:Biotin-Asp-Ser-Gly-Cys-Phe-Gly-Arg-Arg-Leu-Asp-Arg-Ile-Gly-Ser-Leu-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys-Asn-Val-Leu-Arg-Arg-Tyr
  • 单字母序列Bio-DSGCFGRRLDRIGSLSGLGCNVLRRY
  • 氨基酸总数:26 aa
  • 分子式:C120H200N42O36S2
  • 分子量:2871.30
  • 结构修饰说明
  1. N 端氨基共价偶联生物素(Biotin / Bio);
  2. 分子内环化:Cys⁵ 与 Cys²¹ 形成分子内二硫键(Cys5,21 disulfide bridge),环状结构为受体识别必需构象;
  3. 线性骨架,C 端游离羧基,无 C 端酰胺、焦谷氨酸、乙酰、侧链定点修饰。
  • 结构式

二、理化性质

1.紫外定量:含 Phe、Tyr,280 nm 紫外吸收稳定,可直接分光光度法定量。

2.稳定性要点

  • 无 Met,但含一对 Cys 形成二硫键;体系严禁 DTT、β-ME 等还原剂,否则环结构断裂、多肽失活;
  • Tyr、Phe 为强光敏芳香残基,溶解、分装、储存全程避光;
  • 仅 N 端生物素封闭氨基端,C 端无保护,易被羧肽酶、内肽酶降解,工作液现配现用。

3.酸碱特性
酸性残基:Asp;碱性残基:Arg;整体弱碱性多肽;适配 pH 6.0–7.4 PBS、猪心肌原代细胞培养液、猪血浆缓冲体系。

4.溶解性
Ser、Asn、Gly 大量亲水残基搭配带电酸碱氨基酸,水溶性优异,中性缓冲液常温完全溶解。

5.空间构象
Cys5-Cys21 二硫键构成 BNP 特征环状核心,是猪 NPR-A/NPR-B 受体关键识别区域;N 端生物素位于环外侧,不破坏环结构、不影响配体与受体结合亲和力。

三、来源背景

BNP-26 是猪心室心肌分泌内源活性利钠肽,调控家畜心血管容量、血压稳态;N 端生物素标记并保留天然二硫环,作为猪专属 NPR 受体亲和探针,用于反刍家畜心血管内分泌研究。

四、生物学功能

  1. 特异性激活猪 NPR-A/NPR-B 受体,发挥利尿利钠、舒张血管、降低心脏负荷作用;
  2. 抑制肾素 - 血管紧张素 - 醛固酮通路,减轻心肌肥厚、纤维化;
  3. 调控血管平滑肌舒张、内皮保护;
  4. 生物素标签可特异性结合链霉亲和素树脂,Pull-down 富集猪利钠肽受体及下游信号互作蛋白,用于竞争性结合、细胞荧光示踪受体内吞与组织分布。

五、科研应用

  1. 猪原代心肌、主动脉内皮细胞 Pull-down 捕获 NPR-A/NPR-B 受体及结合蛋白;
  2. 利钠肽受体激动剂 / 拮抗剂体外筛选、配体竞争结合实验;
  3. 生猪心衰、高血压、心肌损伤体外细胞模型;
  4. 人 / 大鼠 / 猪 BNP 跨物种序列、受体亲和力构效对比研究;
  5. 免疫荧光示踪猪心脏、血管组织利钠肽受体定位。

六、溶解与储存规范

  1. 溶解:pH7.2 无菌 PBS 常温避光配制,全程禁止添加还原剂,减少敞口放置避免二硫键氧化断裂;
  2. 冻干粉:短期 - 20 ℃避光密封;长期分装充氮气隔氧,-80 ℃避光储存;
  3. 工作液:单次分装避免反复冻融;2~8 ℃避光存放不超过 3 天,现配现用为佳。

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